第一題    對于OATP1B1和1B3，采用共孵育也可以達到要求，是否還需要預(yù)孵育？

答：可以。由于OATP1B1和1B3抑制劑存在時間依賴效應(yīng)，需要與轉(zhuǎn)運體細胞預(yù)孵育后再加入底物。這樣抑制效應(yīng)會更明顯。

第二題    SLC轉(zhuǎn)運體細胞在藥物作用前去掉培養(yǎng)液后，是否需要用反應(yīng)緩沖液預(yù)孵育幾分鐘？

答：需要加入反應(yīng)緩沖液預(yù)孵育五分鐘使細胞適應(yīng)新的緩沖體系。

第三題    SLC轉(zhuǎn)運體細胞藥物作用終止后，用乙腈、甲醇等有機溶劑或反復(fù)凍融方法是否都可以裂解細胞？

答：都可以。若乙腈、甲醇等有機溶劑影響后續(xù)檢測可采用反復(fù)凍融方法。

第四題    高通透性的化合物為什么不需要預(yù)孵育？透膜的能力是否和轉(zhuǎn)運蛋白結(jié)合能力一致？

答：高通透性的化合物是通過自由擴散進入細胞，預(yù)孵育可能使化合物不經(jīng)過轉(zhuǎn)運體就進入細胞了。其透膜的能力是和轉(zhuǎn)運蛋白結(jié)合的能力不一樣。

第五題    瞬轉(zhuǎn)SLC細胞在液氮凍存，時間久了是否會影響蛋白活性？

答：理論上液氮凍存時間久了不會影響蛋白活性。但對于不同批次的轉(zhuǎn)運體細胞需要穩(wěn)定性檢測進行評判。

第六題    囊泡的結(jié)果如何評判？

答：ABC轉(zhuǎn)運體需要ATP水解提供轉(zhuǎn)運所需能量，可設(shè)ATP處理組和AMP處理組，對比兩組囊泡對底物的轉(zhuǎn)運效果。

第七題    ABC轉(zhuǎn)運體和SLC轉(zhuǎn)運體是否對化學(xué)藥物分子大小、水溶性或脂溶性有選擇性？抗體藥或放射性標(biāo)記的藥物是否具有選擇性？

答：ABC轉(zhuǎn)運體和SLC轉(zhuǎn)運體對化學(xué)藥物分子大小、水溶性或脂溶性是有選擇性。抗體藥一般不經(jīng)過轉(zhuǎn)運體轉(zhuǎn)運。

第八題    在運用SLC轉(zhuǎn)運體細胞的時候，為什么最高濃度藥物的攝取率比次高濃度藥物的攝取率突然增加幾十倍？

答：藥物可能與SLC轉(zhuǎn)運體細胞膜存在非特異性結(jié)合，藥物與SLC轉(zhuǎn)運體細胞孵育后洗滌不充分，最高濃度藥物組在細胞膜上殘留更多，導(dǎo)致最高濃度藥物的攝取率比次高濃度藥物的攝取率突然增加的假象。

第九題    ABC囊泡試驗AMP組底物攝取比ATP組高是何原因？

答：可能是底物與囊泡反應(yīng)終止后ATP組底物從囊泡腔內(nèi)流回緩沖液。囊泡懸液轉(zhuǎn)移到過濾裝置必須迅速，并且必須遵循一致的時間軸，以實現(xiàn)低標(biāo)準(zhǔn)差和數(shù)據(jù)的可重復(fù)性。

第十題    ABC用Caco2體系需要考慮回收率，有化合物預(yù)試與Transwell膜沒有吸附，化合物溶解度也可以，在細胞中也是穩(wěn)定的，最后回收率還是偏低，還有哪些因素導(dǎo)致？

答：該化合物可能不僅僅是一種轉(zhuǎn)運體的底物。這種情況需要通過特定ABC或SLC的轉(zhuǎn)運體細胞進行驗證。

十一題    地高-辛的在MDCK-MDR1中的ER一般在什么范圍內(nèi)？范圍在200左右可以通過哪些條件進行調(diào)整？

答：有文獻報道地高-辛在MDCK-MDR1中的ER值為67（第十三次臨床藥理大會論文匯編，黎玉華，P88-P96。需要考慮細胞的生長狀態(tài)，單層細胞跨膜電阻、熒光黃在細胞單層中的表觀通透率等條件。

發(fā)    文    章    得    獎    勵

凡使用本公司產(chǎn)品，在國內(nèi)及國際刊物上發(fā)表論文（論文發(fā)表日起一年內(nèi)），并注明產(chǎn)品屬于IPHASE BIOSCIENCES CO,LTD / 匯智和源生物技術(shù)（蘇州）有限公司所有，即可申請獎勵。根據(jù)發(fā)表刊物影響因子不同，給予不同金額獎品：

非SCI論文及IF≤5分，500元禮品；

5分＜IF≤8分 800元；

8分＜IF≤10分 1000元；

IF≥10分 2000元；

注：禮品卡也可兌換同等金額產(chǎn)品購買抵用券；

活動多多，禮品豐厚，快來參與吧！

關(guān)    于    我    們

匯智和源，致力于為創(chuàng)新藥研發(fā)企業(yè)及生命科學(xué)研究機構(gòu)提供高品質(zhì)的生物試劑，IPHASE為公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research"。